Een snelle en gevoelige fluorescentiebiosensor op base van plasmonische PCR

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Een snelle en gevoelige fluorescentiebiosensor op base van plasmonische PCR

Gevoeligheid en toepassingen van de PCR Single-Strand Conformation Polymorphism-methode

La PCR Single-Strand Conformation Polymorphism est une méthode utilisée pour identifier et détecter des mutations et est maintenant bien connue pour ses nombreuses functions sur les êtres vivants. Cet article discutera des détails expérimentaux, des limites et de la sensibilité de la méthode PCR de polymorphisme de conformation monobrin par rapport à toute la littérature existante à notre disposition jusqu’à aujourd’hui. Les situations d’extraction d’ADN génomique, d’amplification PCR et de polymorphisme de conformation easy brin (focus d’électrophorèse sur gel de polyacrylamide, traitement de dissociation de l’ADN double brin) et la comparaison avec le polymorphisme de longueur de fragment de restriction PCR sont présentées.

Depuis sa découverte en 1989 , il y a eu de nombreuses variantes, improvements et modifications de la méthode, ce qui la rend très facile, sûre, rapide et pour cette raison largement appliquée dans le diagnostic clinique, la médecine légale, biochimique, vétérinaire, microbiologique, alimentaire et laboratoires environnementaux. L’une des functions possibles de la méthode est le diagnostic et l’identification de mutations dans de nouvelles souches de coronavirus, automotive la science a besoin de plus d’outils pour s’attaquer au problème de cette pandémie. La méthode PCR de polymorphisme de conformation monobrin peut être appliquée dans de nombreux cas à situation que des échantillons de contrôle soient disponibles et que les situations requises de la méthode soient remplies.

Beheer van pediatrische niet-pathogene bloedculturen na introduction van PCR-technologie

Contexte :  L’identification rapide des organismes signalés dans les hémocultures positives par réaction en chaîne par polymérase (PCR) peut identifier avec précision une bactérie non pathogène et réduire le temps d’identification définitive, par rapport aux méthodes microbiologiques traditionnelles. Remark cette technologie affecte la gestion clinique et antimicrobienne chez les enfants avec des bactéries non pathogènes identifiées dans une hémoculture sans aide à la décision n’a pas été évaluée.

Méthodes :  Une étude rétrospective de la gestion des enfants avec des résultats d’hémoculture positifs pour les organismes non pathogènes avant et après la mise en œuvre de la technologie PCR. La gestion des antibiotiques de chaque cohorte, la fréquence des cultures répétées et les visites de retour à un service d’urgence (ED) ont été comparées.

Résultats :  Au complete, 136 sufferers pendant cette période (49 % [ n  = 67] pré-PCR et 51 % [ n  = 69] post-PCR) ont eu une hémoculture constructive pour la bactérie non pathogène. Les sufferers admis ont eu un deuxième échantillon envoyé pour take a look at à moins d’events ( P  = 0,04) ; cependant, l’exposition totale aux antibiotiques ne différait pas significativement ( P  = 0,3) après l’introduction de la technologie PCR. Il n’y avait pas de différence significative dans la durée du séjour après l’intervention ( P  = 0,12). Les sufferers sortis directement du service d’urgence ont eu moins de visites de retour P  = .02) et ont reçu moins d’hémocultures répétées ( P = .04), et les antibiotiques ont été administrés à moins d’events après le retour ( P  = .04) après l’introduction de la technologie PCR.

Conclusions :  Avec l’ ajout de la technologie PCR , les sufferers ayant des hémocultures positives pour les bactéries non pathogènes ont reçu moins d’antibiotiques, moins d’hémocultures répétées et moins d’évaluations répétées à l’urgence.

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Polyclonal GPR81 Antibody (C-term)

APR16611G 0.1ml
EUR 580.8
Description: A polyclonal antibody raised in Rabbit that recognizes and binds to Human GPR81 (C-term). This antibody is tested and proven to work in the following applications:

Polyclonal FKSG80 / GPR81 Antibody (C-Terminus)

APR15995G 0.05mg
EUR 580.8
Description: A polyclonal antibody raised in Rabbit that recognizes and binds to Human FKSG80 / GPR81 (C-Terminus). This antibody is tested and proven to work in the following applications:

Polyclonal FKSG80 / GPR81 Antibody (N-Terminus)

APR15997G 0.05mg
EUR 580.8
Description: A polyclonal antibody raised in Rabbit that recognizes and binds to Human FKSG80 / GPR81 (N-Terminus). This antibody is tested and proven to work in the following applications:

Polyclonal FKSG80 / GPR81 Antibody (Extracellular Domain)

APR15996G 0.05mg
EUR 580.8
Description: A polyclonal antibody raised in Rabbit that recognizes and binds to Human FKSG80 / GPR81 (Extracellular Domain). This antibody is tested and proven to work in the following applications:

G Protein-Coupled Receptor 81 (GPR81) Antibody

abx233610-100ug 100 ug
EUR 661.2

G Protein-Coupled Receptor 81 (GPR81) Antibody

20-abx008192
  • EUR 360.00
  • EUR 526.80
  • EUR 226.80
  • 100 ul
  • 200 ul
  • 30 ul

G Protein-Coupled Receptor 81 (GPR81) Antibody

abx430538-200ul 200 ul
EUR 460.8

G Protein-Coupled Receptor 81 (GPR81) Antibody

20-abx147554
  • EUR 510.00
  • EUR 410.40
  • 100 ug
  • 50 ug

G Protein-Coupled Receptor 81 (GPR81) Antibody

abx028676-400ul 400 ul
EUR 627.6

G Protein-Coupled Receptor 81 (GPR81) Antibody

abx028676-80l 80 µl
EUR 343.2

GPR81 Peptide

42-015P 0.1 mg
EUR 405.6
Description: (IN) GPR81 / FKSG80 Peptide

Anti-GPR81 antibody

PAab03610 100 ug
EUR 494.4

GPR81 Blocking Peptide

20-abx063821
  • EUR 326.40
  • EUR 493.20
  • 1 mg
  • 5 mg

GPR81 Blocking Peptide

DF2766-BP 1mg
EUR 234

Anti-GPR81 / FKSG80 antibody

STJ71944 100 µg
EUR 430.8

GPR81 ELISA KIT|Human

EF009971 96 Tests
EUR 826.8

anti- GPR105 antibody

FNab03588 100µg
EUR 658.5
Description: Antibody raised against GPR105

anti- GPR107 antibody

FNab03589 100µg
EUR 702
Description: Antibody raised against GPR107

anti- GPR108 antibody

FNab03590 100µg
EUR 658.5
Description: Antibody raised against GPR108

anti- GPR116 antibody

FNab03591 100µg
EUR 658.5
Description: Antibody raised against GPR116

anti- GPR132 antibody

FNab03593 100µg
EUR 606.3
Description: Antibody raised against GPR132

anti- GPR137 antibody

FNab03594 100µg
EUR 606.3
Description: Antibody raised against GPR137

anti- GPR142 antibody

FNab03597 100µg
EUR 702
Description: Antibody raised against GPR142

anti- GPR161 antibody

FNab03598 100µg
EUR 606.3
Description: Antibody raised against GPR161

anti- GPR162 antibody

FNab03599 100µg
EUR 702
Description: Antibody raised against GPR162

anti- GPR177 antibody

FNab03601 100µg
EUR 658.5
Description: Antibody raised against GPR177

anti- GPR17 antibody

FNab03600 100µg
EUR 658.5
Description: Antibody raised against GPR17

anti- GPR22 antibody

FNab03603 100µg
EUR 606.3
Description: Antibody raised against GPR22

anti- GPR35 antibody

FNab03605 100µg
EUR 702
Description: Antibody raised against GPR35

anti- GPR50 antibody

FNab03607 100µg
EUR 658.5
Description: Antibody raised against GPR50

anti- GPR50 antibody

FNab03608 100µg
EUR 658.5
Description: Antibody raised against GPR50

anti- GPR83 antibody

FNab03611 100µg
EUR 702
Description: Antibody raised against GPR83

anti- GPR137B antibody

FNab03595 100µg
EUR 702
Description: Antibody raised against GPR137B

anti- GPR3 antibody

FNab03604 100µg
EUR 702
Description: Antibody raised against GPR3

anti- GPR183/EBI2 antibody

FNab03602 100µg
EUR 658.5
Description: Antibody raised against GPR183/EBI2

Anti-OR51E1/Gpr164 Antibody

A30874 100ul
EUR 476.4
Description: Rabbit Polyclonal OR51E1/Gpr164 Antibody. Validated in IF, WB and tested in Human.

Gpr81 ORF Vector (Rat) (pORF)

ORF067824 1.0 ug DNA
EUR 607.2

Gpr81 ORF Vector (Mouse) (pORF)

ORF046573 1.0 ug DNA
EUR 607.2

Anti-GPCR GPR40 Antibody

STJ501005 100 µg
EUR 571.2

Anti-FFAR3/Gpr41 Antibody

A02437 100ul
EUR 476.4
Description: Rabbit Polyclonal FFAR3/Gpr41 Antibody. Validated in IF and tested in Human, Mouse.

anti- GPR101-Specific antibody

FNab03587 100µg
EUR 702
Description: Antibody raised against GPR101-Specific

anti- GPR123-Specific antibody

FNab03592 100µg
EUR 702
Description: Antibody raised against GPR123-Specific

anti- GPR139-Specific antibody

FNab03596 100µg
EUR 606.3
Description: Antibody raised against GPR139-Specific

Anti-SUCNR1/Gpr91 Antibody

A08485 100ul
EUR 476.4
Description: Rabbit Polyclonal SUCNR1/Gpr91 Antibody. Validated in WB and tested in Human, Mouse, Rat.

Anti-TAS1R2 / GPR71 antibody

STJ71396 100 µg
EUR 430.8

anti- GPR58/TAAR2 antibody

FNab03609 100µg
EUR 658.5
Description: Antibody raised against GPR58/TAAR2

Anti-GPCR GPR3 Antibody

STJ501253 100 µg
EUR 571.2

Anti-GPCR GPR40 Antibody FITC

STJ501007 100 µg
EUR 703.2

anti- GPR37/Pael-R antibody

FNab03606 100µg
EUR 606.3
Description: Antibody raised against GPR37/Pael-R

Anti-CXCR3 / GPR9 antibody

STJ70901 100 µg
EUR 430.8

Anti-GPCR GPR40 Antibody BIOTIN

STJ501006 100 µg
EUR 703.2

Anti-GPCR GPR40/FFAR1 Antibody

A01349-2 100ug/vial
EUR 352.8

Anti-GPCR GPR3 Antibody FITC

STJ501255 100 µg
EUR 703.2

Gpr81 sgRNA CRISPR Lentivector set (Rat)

K6130201 3 x 1.0 ug
EUR 406.8

Anti-GPCR GPR3 Antibody BIOTIN

STJ501254 100 µg
EUR 703.2

Gpr81 sgRNA CRISPR Lentivector set (Mouse)

K3904701 3 x 1.0 ug
EUR 406.8

GPR81 sgRNA CRISPR Lentivector set (Human)

K0893201 3 x 1.0 ug
EUR 406.8

Anti-LGR4/Gpr48 Monoclonal Antibody

M02134 100uL
EUR 531.6
Description: Mouse Monoclonal LGR4/Gpr48 Antibody. Validated in IHC, WB and tested in Human.

Polyclonal Goat Anti-GPR81 / FKSG80 Antibody

APR16285G 0.1 mg
EUR 580.8
Description: A polyclonal antibody raised in Goat that recognizes and binds to Human Goat Anti-GPR81 / FKSG80 . This antibody is tested and proven to work in the following applications:

Polyclonal Goat Anti-TAS1R2 / GPR71 Antibody

AMM05957G 0.1 mg
EUR 580.8
Description: A polyclonal antibody raised in Goat that recognizes and binds to Human Goat Anti-TAS1R2 / GPR71 . This antibody is tested and proven to work in the following applications:

GPR81 3'UTR GFP Stable Cell Line

TU059183 1.0 ml
EUR 1825.2

Gpr81 3'UTR GFP Stable Cell Line

TU255392 1.0 ml Ask for price

Gpr81 3'UTR GFP Stable Cell Line

TU159042 1.0 ml Ask for price

GPR81 Protein Vector (Rat) (pPM-C-HA)

PV271296 500 ng
EUR 723.6

GPR81 Protein Vector (Rat) (pPB-C-His)

PV271294 500 ng
EUR 723.6

GPR81 Protein Vector (Rat) (pPB-N-His)

PV271295 500 ng
EUR 723.6

GPR81 Protein Vector (Rat) (pPM-C-His)

PV271297 500 ng
EUR 723.6

Anti-GPCR GPR7/NPBWR1 Antibody

A08247-1 100ug/vial
EUR 352.8

GPR81 Protein Vector (Mouse) (pPM-C-HA)

PV186292 500 ng
EUR 723.6

Anti-LGR5/GPR49 Rabbit Monoclonal Antibody

M00239 100ug/vial
EUR 476.4
Description: Rabbit Monoclonal LGR5/GPR49 Antibody. Validated in Flow Cytometry, IP, WB and tested in Human, Mouse, Rat.

GPR81 Protein Vector (Mouse) (pPB-C-His)

PV186290 500 ng
EUR 723.6

GPR81 Protein Vector (Mouse) (pPB-N-His)

PV186291 500 ng
EUR 723.6

GPR81 Protein Vector (Mouse) (pPM-C-His)

PV186293 500 ng
EUR 723.6

GPR81 3'UTR Luciferase Stable Cell Line

TU009183 1.0 ml
EUR 1825.2

Gpr81 3'UTR Luciferase Stable Cell Line

TU109042 1.0 ml Ask for price

Gpr81 3'UTR Luciferase Stable Cell Line

TU205392 1.0 ml Ask for price

Anti Human GPR120 Monoclonal Antibody (Clone No. 2B6)

KG138 each
EUR 856.8
Description: The Anti Human GPR120 Monoclonal Antibody (Clone No. 2B6) is available in Europe and for worldwide shipping via Gentaur.

Gpr81 sgRNA CRISPR Lentivector (Rat) (Target 1)

K6130202 1.0 ug DNA
EUR 184.8

Gpr81 sgRNA CRISPR Lentivector (Rat) (Target 2)

K6130203 1.0 ug DNA
EUR 184.8

Gpr81 sgRNA CRISPR Lentivector (Rat) (Target 3)

K6130204 1.0 ug DNA
EUR 184.8

Gpr81 sgRNA CRISPR Lentivector (Mouse) (Target 1)

K3904702 1.0 ug DNA
EUR 184.8

Gpr81 sgRNA CRISPR Lentivector (Mouse) (Target 2)

K3904703 1.0 ug DNA
EUR 184.8

Gpr81 sgRNA CRISPR Lentivector (Mouse) (Target 3)

K3904704 1.0 ug DNA
EUR 184.8

GPR81 sgRNA CRISPR Lentivector (Human) (Target 1)

K0893202 1.0 ug DNA
EUR 184.8

GPR81 sgRNA CRISPR Lentivector (Human) (Target 2)

K0893203 1.0 ug DNA
EUR 184.8

GPR81 sgRNA CRISPR Lentivector (Human) (Target 3)

K0893204 1.0 ug DNA
EUR 184.8

Anti Mouse GPR40 Monoclonal Antibody (Clone No. G16)

KG116 each
EUR 919.2
Description: The Anti Mouse GPR40 Monoclonal Antibody (Clone No. G16) is available in Europe and for worldwide shipping via Gentaur.

anti- GPRIN1 antibody

FNab03615 100µg
EUR 658.5
Description: Antibody raised against GPRIN1

Rabbit Anti Human Gpr15 (N-Terminal) Polyclonal Antibody

CPBT-65692RH 0.1 mg
EUR 696

anti- GPRASP2 antibody

FNab03613 100µg
EUR 658.5
Description: Antibody raised against GPRASP2

Een nieuwe methode om binaire CRISPR-vectoren te construeren voor plantentransformatie door een enkele ronde van PCR-amplificatie

CRISPR/Cas9 est un outil établi et versatile pour l’édition du génome. Cependant, la plupart des méthodes utilisées pour générer des clones d’expression pour le CRISPR/Cas9 prennent du temps . Par conséquent, nous avons développé un protocole en une étape pour introduire des cassettes d’expression sgRNA directement dans des vecteurs binaires (Liu  et al. , 2020). Dans cette approche, nous avons optimisé la PCR multiplex pour produire un produit de PCR chevauchant en une seule réaction pour générer la cassette d’expression sgRNA .

Nous avons également amplifié deux cassettes d’ expression de sgRNA through un seul cycle de PCR. Ensuite, la ou les cassettes d’expression sgRNA sont clonées dans les vecteurs binaires dans une réaction Gateway LR ou Golden gate. Le système rapporté ici fournit une procédure beaucoup plus efficace et plus easy pour construire des clones d’expression pour l’édition du génome médiée par CRISPR/Cas9. Dans ce protocole, nous décrivons les directions détaillées étape par étape pour l’utilisation de ce système.

Detectie en kwantificering van  EGFR  T790M-mutatie in vloeibare biopsieën door middel van digital druppel PCR

Contexte :  La biopsie liquide permet l’ identification de mutations cancéreuses ciblables de manière minimalement invasive. Chez les sufferers atteints d’un most cancers du poumon non à petites cellules (NSCLC) avancé, la PCR numérique en gouttelettes (ddPCR) est de plus en plus utilisée pour génotyper le gène du récepteur du facteur de croissance épidermique ( EGFR ) dans l’ADN acellulaire circulant (cfDNA). Cependant, la sensibilité de cette méthode est encore débattue. Le however de cette étude était de mettre en œuvre et d’évaluer les performances d’un take a look at ddPCR pour détecter la   mutation EGFR T790M dans les biopsies liquides.

Méthodes :  Un take a look at ddPCR a été optimisé pour détecter la  mutation EGFR  T790M dans des échantillons de plasma de 77 sufferers atteints de CBNPC en development.

Résultats :  Notre take a look at ddPCR a permis la détection et la quantification de la  mutation EGFR  T790M à une fréquence d’allèle cfDNA aussi faible que 0,5 %. La mutation a été détectée dans 40 échantillons de plasma, correspondant à un taux de positivité de 52 %. Le nombre de molécules mutantes par mL de plasma variait de 1 à 6 000. Une re-biopsie a été analysée pour 12 sufferers qui avaient un take a look at plasmatique négatif et la mutation a été détectée dans 2 cas. Une deuxième biopsie liquide a été réalisée chez 6 sufferers et la mutation a été détectée dans Three cas.

Conclusions :  Cette étude met en évidence la valeur de la ddPCR pour détecter et quantifier la   mutation EGFR T790M dans les biopsies liquides dans un environnement clinique réel. Nos résultats suggèrent que des assessments ddPCR répétés dans le cfDNA peuvent éviter une rebiopsie tissulaire chez les sufferers incapables de fournir un échantillon de tissu tumoral adapté à l’analyse moléculaire.

 

Een snelle en gevoelige fluorescentiebiosensor op base van plasmonische PCR

La PCR plasmonique utilisant des nanoparticules métalliques a montré de grands avantages par rapport à l’équipement de thermocycleur business en termes de coût, de taille et de temps de traitement . Cependant, en raison de la forte extinction de la fluorescence, la PCR à base de nanoparticules plasmoniques nécessite des étapes de post-traitement supplémentaires telles que la centrifugation et l’électrophorèse sur gel. Ce processus augmente le temps de diagnostic world, compensant ainsi les avantages du thermocyclage rapide. Nous rapportons ici une méthode de dosage par PCR photothermique plasmonique (PPT-PCR) rapide et wise basée sur la détection de fluorescence in situ à level ultimate.

En utilisant des nanoparticules magnétiques bifonctionnelles plasmoniques , la PPT-PCR impliquant 30 thermocycles et la détection de fluorescence après séparation magnétique a montré avec succès que les cibles d’ADN peuvent être détectées en 5,5 minutes. La limite de détection (3,Three copies par L) est comparable à celle de la PCR quantitative en temps réel classique ; cependant, le temps de dosage est environ 5,5 fois plus courtroom pour la PPT-PCR. La stratégie consistant à combiner l’ effet photothermique et la séparation magnétique en une seule particule ouvrira de nouveaux horizons dans le développement de biocapteurs rapides et sensibles basés sur la PCR pour les assessments au level de service.

Comorbiditeit en leeftijd worden in verband gebracht met aanhoudende COVID-19 PCR-positiviteit

Objectifs :  L’impression de la démographie et des comorbidités sur la durée de la positivité de la PCR par écouvillonnage nasopharyngé COVID-19 reste incertain. L’objectif de notre analyse est de déterminer l’impression de l’âge, de l’admission en unité de soins intensifs (USI), des comorbidités et de l’origine ethnique sur la durée de positivité de la PCR COVID-19 chez les sufferers hospitalisés dans un grand groupe d’hôpitaux.

Méthode :  Nous avons étudié 530 sufferers d’un grand système hospitalier et le délai jusqu’à la négativité de l’ARN du virus SARS-CoV-2 à tout second pendant l’hospitalisation ou après la sortie de l’hôpital était le critère d’évaluation principal. Nous avons inclus des sufferers de 18 ans ou plus qui ont été testés positifs pour COVID-19 lors d’une visite en hospitalisation, en ambulatoire ou aux urgences entre le 1er février 2020 et le 14 avril 2020.

Résultats :  Dans l’ensemble, 315 (59,4 %) de notre inhabitants de sufferers ont continué d’avoir une PCR d’ARN du virus SARS-CoV-2 constructive Four semaines après le take a look at positif preliminary. Nous avons constaté que l’âge> 70 ans, la maladie rénale chronique, l’hypertension, l’hyperlipidémie, l’obésité ou la maladie coronarienne sont associés à une positivité persistante de la PCR pendant plus de Four semaines après le diagnostic preliminary.

Conclusion : L’  âge et la présence de comorbidités doivent être pris en considération lors de l’interprétation d’un take a look at PCR COVID positif.

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